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As análises toxicológicas forenses caracterizam-se pela investigação de compostos de interesse forense, em especial drogas de abuso, em diversas matrizes biológicas. As características particulares de cada matriz determinam quais técnicas de preparo de amostra são requeridas, ainda, cada qual possui a esta associadas vantagens e limitações, que devem ser observadas pelo analista. São aspectos fundamentais a consideração do intervalo de concentração do analito na amostra, a janela de detecção, a complexidade e o conhecimento de como se dá a distribuição da droga pesquisada nas matrizes biológicas. Dependendo do tipo de droga para detectar o Laboratório podem analisar diferentes tipos de amostras biológicas: urina, saliva e cabelo. Dias aproximados detecção variam a droga a ser testada, o tipo e a frequência de consumo, a pureza, a amostra biológica utilizada para análise, fisiologia da pessoa, etc. Já a técnica de preparo da amostra a ser utilizada deve ser escolhida também com base em sua capacidade de pré-concentração do analito, além da disponibilidade de materiais específicos, tempo e custo. O presente resumo visa delinear as principais matrizes biológicas utilizadas em Toxicologia Forense assim como as técnicas, clássicas e recentes, empregadas no preparo dessas amostras.