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O processo de aclimatização do cafeeiro depende das condições de desenvolvimento das plântulas obtidas in vitro.Fatores externos como espectros de luz e carboidratos podem interferir de maneira significativa na obtenção de umaplântula sadia, apta a ser aclimatizada. Contudo, objetivou-se verificar a influência de espectros de luz e fontes decarboidrato no desenvolvimento in vitro de plântulas do cafeeiro, para posterior aclimatização. Utilizou-se delineamentointeiramente casualizado em esquema fatorial 5x5, sendo as fontes de carboidrato: Sacarose, Frutose, Glicose, Manitol eAusência e espectros de luz: Branca, Azul, Verde, Vermelha e Ausência de luz. As sementes de café foram inoculadasem meio de cultivo MS contendo as diferentes fontes de açúcar, e em seguida cultivadas sem sala de crescimento sob osdiferentes espectros de luz. Após 120 dias avaliou-se a presença de raiz e número médio de folhas.