O processo de degradação das pastagens no Brasil esta em torno de 50% da área cultivada, o que pode ser explicado, principalmente, pela baixa fertilidade do solo e pela falta de reposição de nutrientes, principalmente nitrogênio. Em relação ao nitrogênio, o uso da biotecnologia da fixação biológica do nitrogênio (FBN) apresenta-se como uma alternativa à utilização de fertilizantes nitrogenados, reduzindo os custos de produção e também possíveis impactos ambientais. Nesse sentido este trabalho visou identificar por métodos fenotípicos bactérias fixadoras de nitrogênio associadas à Brachiaria sp., e, posteriormente, analisar a capacidade, in vitro, destas bactérias produzirem hormônios de crescimento (ácido-3-indolacético / AIA). Para tanto, foram analisadas 332 estirpes pertencentes à coleção da UNIFENAS, as quais foram obtidas de amostras de solos cultivados sob Brachiaria sp. e partes de tecido vegetal desta gramínea nas épocas de seca e chuvosa em áreas de pastagens nos municípios de Alfenas e Machado, Sul de Minas Gerais. As amostras foram submetidas às análises biologicas quanto a ocorrência de bactérias diazotróficas associativas, sendo utilizados meios de cultura semi-sólidos e semi-específicos: FAM, JMV, JNFb, LGI e NFb. Posteriormente, as estirpes bacterianas foram testadas quanto à capacidade de produzir AIA através de método colorimétrico, o que resultou em 78 isolados com resultado positivo, sendo 32 originados do solo e 46 de tecido vegetal (raiz).