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Os hormônios esteróides, principalmente o estrógeno (E) e progesterona (P), estão presentes no fluido folicular (FF) e seus níveis variam com a fase de desenvolvimento do folículo. Objetivando determinar a relação entre a concentração de E e P livre no FF de folículos de vários tamanhos, ovários de 500 fêmeas suínas foram coletados imediatamente após o abate. Os folículos localizados na superfície de cada ovário foram classificados em pequenos (FPs) e grandes (FGs) e o FF obtido. Do pool de FF foi determinada a concentração de E, P e a relação E:P. A concentração de E e P foi maior (P < 0,05) nos FGs (13,19 ± 5,43 e 350,18 ± 246,37 ng/mL) que nos FPs (1,37 ± 0,81 e 130,96 ± 43,21 ng/mL). A relação E:P foi de 1,17 nos FPs e 4,95 nos FGs. Durante o desenvolvimento folicular há um aumento de E e P que correspondem ao início da maduração e crescimento dos folículos.