O presente trabalho foi realizado com o objetivo de avaliar a influência da vedação de frascos e de diferentes concentrações da sacarose no cultivo in vitro de morangueiro (Fragaria x ananassa Duch). Propágulos de F. x ananassa foram cultivados em frascos com tampas com e sem orifícios cobertos com filtro. O meio de cultura utilizado foi o MS com 0, 15 e 30 g.L^-1 de sacarose. Analisou-se o teor de clorofila e a funcionalidade. Os morangueiros cultivados em meio sem sacarose apresentaram baixo teor de clorofila. As trocas gasosas favoreceram a produção do pigmento e a funcionalidade estomática.