A amora preta selvagem é uma fruta de clima temperado que precisa de mais estudos para resolver problemas de manejo, homogeneidade e sanidade de mudas. Para realizar pesquisas um importante passo é seu estabelecimento in vitro. Assim sendo o presente trabalho teve como intuito verificar a melhor forma de assepsia de gemas para essa cultura. Foram conduzidos dois ensaios com protocolos diferentes. Após 15 dias de cultivo in vitro foram avaliados a porcentagem de sobrevivência dos explantes, oxidação e contaminação. Sugere-se para o estabelecimento in vitro de gemas de Rubus sp. realizar a imersão em água corrente por um período de 8 horas consecutivo, 1 minuto de imersão em álcool 70º, e 20 minutos em agitação no hipoclorito de sódio a 70%, promovendo menor contaminação fúngica e maior sobrevivência.