A espécie Oenothera sp. pertencente à família Onagraceae é considerada uma planta medicinal, e tem sido pesquisada a mais de 120 anos, porém há apenas alguns resumos disponíveis descrevendo técnicas de cultivo. Sabe-se que a qualidade do solo influencia na transferência de nutrientes e consequentemente no desenvolvimento de uma planta. Sendo assim o experimento, tem como objetivo determinar o melhor substrato para desenvolvimento ex vitro de Oenothera sp. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, constituído de dez tratamentos, com vinte repetições e três sementes por parcela. A semeadura foi realizada em profundidade de três mm, cobertas com seu respectivo substrato, utilizando para a rega, água destilada. As avaliações ocorreram aos dez, trinta e quarenta dias após a semeadura. Concluiu-se que o substrato interfere diretamente na germinação das sementes, sendo fator determinante para o desenvolvimento e sobrevivência de Oenothera sp.