Objetivou-se com o projeto identificar e avaliar o potencial antagônico in vitro de um isolado de Bacillus spp. sobre o crescimento micelial dos seguintes fungos fitopatogênicos: Colletotrichum acutatum, Botrytis cinerea e Sclerotinia sclerotiorum. O efeito antagônico do isolado de Bacillus spp. foi avaliado utilizando-se a técnica de cultura pareada. Foram avaliados o tamanho médio das colônias e a porcentagem de inibição do crescimento micelial (PIC) no 7º e 14º dia após a incubação a 25 ºC ± 2 ºC e fotoperíodo de 12 h. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com 6 tratamentos e 5 repetições. Os dados coletados foram submetidos à análise de variância e ao teste Scott-Knott (P<0,05). Observou-se que a porcentagem de inibição do crescimento micelial de C. acutatum foi maior após quatorze dias de incubação. Comparando as avaliações dos dois dias, verificou-se que para os fungos B. cinerea e S. sclerotiorum a paralisação do crescimento micelial na presença do Bacillus spp. ocorreu no 7º dia de incubação. O isolado de Bacillus spp. mostrou-se eficaz na inibição do crescimento micelial de todos os fitopatógenos avaliados.